用于显微镜观察的标本必须经过一定的准备过程才能在显微镜下形成清晰的像。在入射照明和投射照明中，对于标本的光学要求有很大区别，在入射照明中像是由标本的反射光所形成的；相反，在投射照明中像是由透射光所形成的，在这种情况下反射光对于像的形成不仅无益，而且会降低像的清晰度。
       用入射光观察的标本，它的准备工作十分简单，只是清洁标本的表面并切割为适当大小的小块。而用透射光观察的标本，必须具有由于光吸收的差异而产生的一定反差，才能在显微镜下被观察到。为此，标本必须经过一系列复杂的处理和制备过程，这种制备技术就是我们一般所说的生物显微技术。从光学观点出发，对于用透射光观察的显微镜标本有如下要求：
       1、适当的厚度   这种厚度在较好的光学系统中能够达到尽可能高的分辨力，并且与这个系统的场深相适应。
       2、足够的透明度。
       3、能够形成建立在吸收差异上的足够的反差。