对于数值孔径在0.4以上的物镜来说盖玻片被包括在光学矫正之内，它成为像的形成中一个不可缺少的部分。盖玻片的基本功能是对标本起保护作用，但是它的存在却影响到来自标本光线的光路。在使用干系物镜时，来自标本的光线在玻璃空气界面上被折射。光线与光轴之间的角度越大，这种影响也就愈明显，这种现象产生了一种很多方面与透镜的球面差相似的效应。除了盖玻片之外，在盖玻片下面的封藏剂也起一定的作用，但是由于这层封藏剂一般很薄，因此在引起这种光学现象中盖玻片起着远为重要的作用。
        盖玻片的厚度会影响这种效应，因此只有对于一定的盖玻片厚度，物镜的矫正才是可能的。如果盖玻片太薄或太厚，都会由于这种负球面差而使像模糊或降低像的质量。显微镜中不同孔径的物镜，对于盖玻片厚度的要求有不同的可允许偏差范围，物镜的孔径愈大，这种可允许的偏差范围就愈小。